原代细胞培养的步骤一般是：取材→分离→培养和维持，今天我们重点介绍原代细胞的取材和分离方法。
一、取材
人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。
取材的基本要求：
①取材要注意新鲜和保鲜
②应严格无菌
③防止机械损伤
④去除无用组织和避免干燥
⑤应注意组织类型、分化程度、年龄等
⑥作好记录
各类组织的取材技术：
①皮肤和粘膜的取材
主要取自于手术过程中的皮片，方法似外科取断层皮片手术操作，但面积一般2~4平方厘米。
②内脏和实体瘤的取材
内脏除消化道外基本是无菌的，但取材时要明确和熟悉所需组织的类型和部位，实体瘤取材时要取肿瘤细胞丰富的区域，要避开破溃、坏死液化部分，以防污染，尽量去除混杂的结缔组织。
③血液细胞的取材
血细胞、淋巴细胞的取材，一般多抽取静脉外周血，或从淋巴组织中(如脾、扁桃体、胸腺、淋巴结等)分离细胞，取材时应注意抗凝。
④骨髓、羊水、胸/腹水细胞取材
严格无菌，注意抗凝，还要尽快分离培养，离心后，用无钙、镁PBS洗两次，再用培养液洗一次后即可培养，不宜低温存放。
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